3,5-二硝基水杨酸(DNS)与还原性糖共热后被还原成棕红色的氨基化合物,该物质在520 nm处有最大吸收峰,且在一定范围内吸收峰的强度(OD值)与还原糖浓度成线性关系,利用比色法可测得样品的含糖量。该方法是半微量定糖法,操作简便,快速,杂质干扰少。
试剂
1)3, 5-二硝基水杨酸试剂(DNS试剂)
甲液:溶解6.9 g苯酚于15.2 mL 10% NaOH中,并稀释至69 mL,在此溶液中加入6.9 g NaHSO3
乙液:称取255 g酒石酸钾钠,加到300 mL 10% NaOH中,再加入880 mL 1%的3,5-二硝基水杨酸。
甲、乙液混合得黄色试剂,贮存于棕色瓶中,室温放置7-10天后备用。
2)0.1%葡萄糖标准液(1 g/L)
准确称取100 mg分析纯的葡萄糖(预先在105℃干燥至恒重),加少量的蒸馏水溶解后定容至100 ml,冰箱中保存备用。